L'ape regina è l'unica femmina feconda dell'alveare. Passa gran parte della sua vita (fino a 5 anni) all'interno, tra i favi, a deporre uova. Esce solo per il volo nuziale, che avviene solo nei primi giorni di vita, durante il quale viene fecondata, anche da più fuchi, e quando decide di sciamare. Esistono tecniche di allevamento delle api regine, che consentono di selezionare la razza e le caratteristiche migliori. Queste api vengono marchiate con colori differenti che indicano l'anno di nascita. All'interno dell'alveare che ha effettuato la sciamatura e che quindi è rimasto orfano, le api allevano, costruendo apposite celle reali, nuove api regine, delle quali però solamente una rimarrà a portare avanti la vita della famiglia.

 Poco prima di nascere producono un suono particolare, un "qua qua" che ricorda il richiamo delle anatre. Il canto delle regine serve per avvisare le sorelle che dovranno conquistarsi l'unico posto disponibile nell'alveare. Può accadere che la prima ape che nasce sia intimorita a tal punto da evitare il confronto, ed essere indotta a sciamare (sciamatura secondaria). Normalmente però l'istinto spinge la nuova ape a cercare le sorelle e ad ucciderle con il pungiglione.